【摘要】本發明公開了一種將短信網址技術、WAP技術和移動博客技術(web2.0)相結合的新型信息系統，包括：移動通信終端，發送表示接入對象的短信息和業務執行指令和上傳數據；包括短信網關的短信網址業務平臺，接收移動通信終端的短信息、業務執行指
【摘要】 本發明提供了一種利用動物乳腺生物反應器生產抗人CD20單克隆抗體的方法。采用本發明所述的方法生產抗人CD20單克隆抗體的表達量顯著高于采用哺乳動物細胞系的表達量，而且所得的嵌合抗體特異結合人B淋巴瘤細胞表面抗原CD20的能力也高于采用哺乳動物細胞系表達得到的抗體，生產成本較之采用哺乳動物細胞系來生產顯著降低，可產生巨大的經濟效益和社會效應。 【專利類型】發明申請 【申請人】北京濟普霖生物技術有限公司; 李寧 【申請人類型】企業,個人 【申請人地址】100094北京市海淀區圓明園西路2號中國農業大學新綜合樓1－111室 【申請人地區】中國 【申請人城市】北京市 【申請人區縣】海淀區 【申請號】CN200610172293.7 【申請日】2006-12-30 【申請年份】2006 【公開公告號】CN100999732A 【公開公告日】2007-07-18 【公開公告年份】2007 【IPC分類號】C12N15/09; C12N15/62; C12N15/85; C07K16/18; C12P21/08; A01K67/027 【發明人】李寧; 湯波; 余姍姍 【主權項內容】1、一種利用動物乳腺生產抗人CD20單克隆抗體的方法，其特征在于它 包括下述步驟： (1)合成鼠抗人CD20單克隆抗體的重鏈可變區序列，插入到含有人免 疫球蛋白γ重鏈恒定區的pCγ載體中，構建得到抗CD20人鼠嵌合抗體的重 鏈乳腺表達載體pBC1-HuG1F； (2)合成鼠抗人CD20單克隆抗體的輕鏈可變區序列，插入到含有人免 疫球蛋白κ輕鏈恒定區的pCκ載體中，構建得到抗CD20人鼠嵌合抗體的輕 鏈乳腺表達載體pBC1-HuK1F； (3)用NotI和SalI分別雙酶切重鏈乳腺表達載體pBC1-HuG1F和輕鏈 乳腺表達載體pBC1-HuK1F，回收含有嵌合抗體重鏈的基因片段和含有嵌合 抗體輕鏈的基因片段，回收的基因片段分別溶于TE溶液，再將含有上述兩 種基因片段的溶液等摩爾比混合，混合溶液稀釋至終濃度為1.0-2.5μg/ml， 然后將所述的混合溶液注射到小鼠的受精卵原核中，再將受精卵移植到同期 發情的假孕母鼠輸卵管中，產生子代，鑒定，得到轉基因小鼠，利用其乳腺 來生產抗人CD20單克隆抗體； (4)用SalI分別酶切輕鏈乳腺表達載體pBC1-HuK1F、重鏈乳腺表達載 體pBC1-HuG1F和雙標記選擇載體pCE-EGFP-IRES-NEO，分別回收含有嵌 合抗體輕鏈的基因片段、含有嵌合抗體重鏈的基因片段及含有綠色熒光蛋白 和新霉素抗性兩個篩選標記的基因片段，回收的基因片段分別溶于TE溶液， 再將回收的含有嵌合抗體輕鏈基因片段的溶液和含有嵌合抗體重鏈基因片段 的溶液等摩爾比混合，然后將含有上述兩種基因片段的溶液與回收的含有雙 標記基因片段的溶液按摩爾比3-10∶1混合，再將制得的混合溶液轉入到大 型家畜的胎兒成纖維細胞中，制得轉基因供體細胞；再將所述供體細胞核移 入去了核的卵母細胞內，融合，培養，制得轉基因克隆囊胚，然后將所述的 克隆囊胚移入已同期發情的受體大型家畜的子宮內，產生子代，鑒定，得到 轉基因大型家畜，利用其乳腺來生產抗人CD20單克隆抗體。 【當前權利人】北京濟福霖生物技術有限公司 【當前專利權人地址】北京市海淀區馬連洼北路158號眾鼎大廈306室 【專利權人類型】有限責任公司(臺港澳與境內合資) 【統一社會信用代碼】911101087740513629 【引證次數】3.0 【被引證次數】10 【他引次數】3.0 【被自引次數】1.0 【被他引次數】9.0 【家族引證次數】3.0 【家族被引證次數】10
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