【摘要】一種用于農作物育苗的六棱缽體多型底育苗盤。它是由多個形狀相同的六棱缽體以矩陣狀緊密排列組合在一個平面上，四周由盤邊框加固組成。這種盤是系列產品，有六棱缽體棱臺底、圓臺底、圓平底、半圓球底、半圓球錐底、尖圓錐底、圓錐臺底、棱錐臺底等多
【摘要】 本發明公開了屬于人陰道上皮細胞培養技術范 圍的一種培養基聯合序貫培養細胞的方法。即用無血清培養基 +含血清培養基的序貫培養，從而可以迅速使陰道上皮原代細 胞大量增殖，傳代成功率在80％左右。 【專利類型】發明申請 【申請人】廖秦平; 吳文湘 【申請人類型】個人 【申請人地址】100034北京市西城區西什庫大街8號北京大學第一醫院婦產科 【申請人地區】中國 【申請人城市】北京市 【申請人區縣】西城區 【申請號】CN200610114239.7 【申請日】2006-11-02 【申請年份】2006 【公開公告號】CN1970742A 【公開公告日】2007-05-30 【公開公告年份】2007 【授權公告號】CN100557017C 【授權公告日】2009-11-04 【授權公告年份】2009.0 【發明人】廖秦平; 吳文湘; 楊慧霞; 劉朝暉; 張岱; 余麗 【主權項內容】1.一種兩種培養基聯合序貫培養人陰道上皮細胞的方法，其特征在于：所述 對人陰道上皮細胞的培養過程如下： (1)陰道上皮細胞的原代培養 1.1取材： 1)陰道前后壁膨出行全子宮切除的患者的陰道組織； 2)子宮肌瘤或子宮腺肌癥行全子宮切除的患者的陰道組織； 3)所有標本術前宮頸陰道細胞學檢查無異常，抗感染篩查均陰性，標本均于未絕經患者； 4)術后病理均為良性疾病； 1.2從手術室取下的新鮮的陰道組織放在加有慶大霉素50μg/ml、青霉素 100U/ml和鏈霉素100U/ml三種抗生素等量混合液的4℃D-Hank’s液的無血清 培養基無菌小瓶內； 1.3消毒：用上述1.2的加有抗生素的D-Hank’s液徹底清洗三遍； 1.4分離：用眼科手術剪刀去除多余的皮下組織，以減少成纖維細胞或其它 細胞的污染； 1.5接種：將上皮組織切成0.2～0.3厘米的小塊，并盡快接種在培養瓶內； 1.6培養：將組織碎塊接種于一次性培養瓶中，加入1.5ml兩性霉素B 0.25μg/ml、青霉素100U/ml和鏈霉素100U/ml三種抗生素等量混合液的角化 細胞無血清培養基(Keratinocyte-SFM，美國GIBCO公司產品，編號17005-042)， 倒置3小時，在37℃，體積比濃度為5％的CO2培養箱中培養； 1.7換液：3天后用上述1.6的無血清培養基進行第一次換液，之后每2-3 天換液一次； 1.8培養2周左右取出組織塊，往K-SFM中加入體積比濃度10％胎牛血清(美 國GIBCO公司)繼續培養約2周左右，原代細胞數量大大增加； (2)陰道上皮細胞的傳代培養 2.1細胞生長匯合至85％-90％時，準備傳代； 2.2吸除或倒掉瓶內舊培養液； 2.3向培養瓶內加入3ml？D-Hank’s液，清洗細胞后倒掉； 2.4向培養瓶內加入1.5ml體積比濃度0.1％的胰蛋白酶(Sigma公司產品) 和體積比濃度0.01％的乙二胺四乙酸(Sigma公司產品)等量混合的消化液； 2.5？37℃消化3-6分鐘； 2.6倒置顯微鏡下觀察，發現胞質回縮、大部分細胞已從培養瓶底部脫落后， 加入1.5ml含體積比濃度10％胎牛血清的DMEM/F-12(美國Hyclone公司產品) 培養液終止消化，反復吹打瓶壁細胞，把液體收集入無菌離心管； 2.7800rpm離心3分鐘； 2.8棄去上清，加入新鮮的含抗生素的無血清培養基，吹打成單細胞懸液， 取一滴在血球計數板計數，其中抗生素為青霉素100U/ml和鏈霉素100U/ml， 二者體積比為1∶1； 2.9按1∶2或1∶3進行傳代； 2.10細胞傳代后次日用上述2.8的無血清培養基進行換液，體外可傳7-9 代，傳代成功率高。 【當前權利人】廖秦平; 吳文湘 【當前專利權人地址】北京市西城區西什庫大街8號北京大學第一醫院婦產科; 【被引證次數】TRUE 【家族被引證次數】TRUE
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