【摘要】本發(fā)明涉及與肝癌患病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的易感基因ESR1的(TA)n多態(tài)性位點(diǎn)(rs3138774)、T29C位點(diǎn)(rs2077647)和Pvu II(rs2234693)位點(diǎn)以及由(TA)n、T29C、Pvu II和Xba I位點(diǎn)組成的單倍
【摘要】 本發(fā)明公開(kāi)了一種大腸桿菌破碎全菌體多克隆 抗體及其制備方法與應(yīng)用，其目的是提供一種大腸桿菌破碎全 菌體多克隆抗體及其制備方法與其在檢測(cè)大腸桿菌中的應(yīng)用。 該制備方法包括以下步驟：1)分離大腸桿菌；2)培養(yǎng)后滅活， 再破碎菌體，得到大腸桿菌破碎全菌體抗原；3)將大腸桿菌破 碎全菌體抗原免疫動(dòng)物；4)從經(jīng)免疫的動(dòng)物中分離、純化抗血 清，得到大腸桿菌破碎全菌體多克隆抗體。用本發(fā)明方法制備 的大腸桿菌破碎全菌體多克隆抗體具有特異性高，純度及效價(jià) 高(大于1∶1×105)，可長(zhǎng)期保存 的優(yōu)點(diǎn)，將其用于環(huán)境及食品檢測(cè)領(lǐng)域中大腸桿菌的免疫檢測(cè) 中，將具有精確性、靈敏度高和廣譜(采用經(jīng)破碎的破碎全菌體 作為抗原)的優(yōu)勢(shì)，應(yīng)用前景廣闊。 ： 【專利類型】發(fā)明申請(qǐng) 【申請(qǐng)人】清華大學(xué) 【申請(qǐng)人類型】學(xué)校 【申請(qǐng)人地址】100084北京市海淀區(qū)清華園 【申請(qǐng)人地區(qū)】中國(guó) 【申請(qǐng)人城市】北京市 【申請(qǐng)人區(qū)縣】海淀區(qū) 【申請(qǐng)?zhí)枴緾N200610113828.3 【申請(qǐng)日】2006-10-18 【申請(qǐng)年份】2006 【公開(kāi)公告號(hào)】CN1935844A 【公開(kāi)公告日】2007-03-28 【公開(kāi)公告年份】2007 【授權(quán)公告號(hào)】CN100535010C 【授權(quán)公告日】2009-09-02 【授權(quán)公告年份】2009.0 【發(fā)明人】何苗; 王娜; 施漢昌; 蔡強(qiáng) 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1、一種大腸桿菌破碎全菌體多克隆抗體的制備方法，包括以下步驟： 1)分離出大腸桿菌，具體方法為：先將樣品接種于牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上 在36-38℃下培養(yǎng)12-36小時(shí)，再將在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基長(zhǎng)出的菌落涂布于品 紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上在36-38℃下培養(yǎng)24-48小時(shí)，接著挑取在品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基 上長(zhǎng)出的紫紅色帶金屬光澤的單菌落，再次接種于品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上在36-38℃ 下培養(yǎng)24-48小時(shí)，然后挑取紫紅色帶金屬光澤的單菌落，接種于添加了質(zhì)量百分濃 度為1.4-1.8％溴甲酚紫的乳糖蛋白胨培養(yǎng)基中在36-38℃下培養(yǎng)12-36小時(shí)，待乳 糖蛋白胨培養(yǎng)基中的紫色褪去，將菌液接種于牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上，對(duì)長(zhǎng)出的 菌落進(jìn)行革蘭氏染色，觀察細(xì)菌形態(tài)，將鑒定為大腸桿菌的菌落再接種于伊紅美藍(lán)培 養(yǎng)基上在36-38℃下培養(yǎng)12-36小時(shí)，菌落呈黑紫色的為大腸桿菌； 2)將分離的大腸桿菌培養(yǎng)后滅活，再破碎菌體，得到大腸桿菌破碎全菌體抗原； 3)將大腸桿菌破碎全菌體抗原免疫動(dòng)物； 4)從經(jīng)免疫的動(dòng)物中分離、純化抗血清，得到大腸桿菌破碎全菌體多克隆抗體。 【當(dāng)前權(quán)利人】清華大學(xué) 【當(dāng)前專利權(quán)人地址】北京市海淀區(qū)清華園 【專利權(quán)人類型】公立 【統(tǒng)一社會(huì)信用代碼】12100000400000624D 【被引證次數(shù)】1 【家族被引證次數(shù)】1
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